食品中三聚氰胺的來源，三聚氰胺是食用物質(zhì)嗎
chanong
三聚氰胺的學名是三氨基三嗪，又稱三聚氰胺、三聚氰酸、三聚氰胺。作為重要的化工原料，主要用于生產(chǎn)塑料、粘合劑、阻燃劑等。每個三聚氰胺分子含有六個氮原子，由于其含氮量較高，被非法添加到飼料生產(chǎn)中，以增加飼料的非蛋白氮含量。 2007年，美國發(fā)生多起寵物中毒死亡事件，2008年，美國發(fā)生多起嬰兒食用嬰兒配方奶粉后被發(fā)現(xiàn)患有尿結(jié)石和三聚氰胺的事件。含有三聚氰胺。雞蛋中的三聚氰胺是一種常見的化工原料，受到社會的廣泛關(guān)注。本節(jié)為全面了解此類化合物提供參考信息，包括三聚氰胺的理化性質(zhì)、代謝動力學、毒性、國家和國際限制要求以及殘留檢測。我們概述了三聚氰胺的樣品前處理和儀器測量方法。和殘留檢測。 1理化性質(zhì)三聚氰胺是一種三嗪類含氮雜環(huán)有機化合物，分子式為C3N6H6，相對分子量為126.15，分子中氮原子含量為66.6%，密度為1.573 g/cm3。三聚氰胺在室溫下為白色單斜晶體，20時在水中的溶解度為31g/L，水沸騰時溶解度增至25g/L。微溶于乙醇，不溶于乙醚、苯、四氯化碳，溶于甲醇、甲醛、乙酸、熱乙二醇、甘油、吡啶等。常壓下熔點為354，迅速加熱至300時升華。雖然通常很穩(wěn)定，但它在高溫下會分解，釋放出氰化物。三聚氰胺的pKb為9.0，其水溶液呈微堿性（pH=8），與鹽酸、硫酸、硝酸、乙酸、草酸等形成三聚氰胺鹽。在中性或弱堿性條件下，與甲醛縮合，生成各種羥甲基三聚氰胺，但在弱酸性條件下（pH 5.56.5），與羥甲基衍生物發(fā)生縮聚反應，生成樹脂產(chǎn)品。當用強酸或強堿水溶液水解時，胺基被羥基取代，生成三聚氰胺、三聚氰胺和氰尿酸。三聚氰胺及其代謝物的化學結(jié)構(gòu)如圖7-12所示。
2 代謝動力學2.1 動物體內(nèi)的吸收和分布Mast 等人對Fischer344 只雄性大鼠的研究發(fā)現(xiàn)，大鼠單次口服0.38 mg 三聚氰胺后，血液、血漿和肝臟濃度相似；這表明給予了三聚氰胺給藥后。一旦進入體內(nèi)，它可以通過體液分布到全身。吳等人給成年大鼠注射10 mg/kg的三聚氰胺，考察其在體內(nèi)的分布，發(fā)現(xiàn)三聚氰胺分布于大鼠的血漿、胰腺、膀胱、腎臟、肝臟和大腦中，且在大鼠體內(nèi)的濃度身體發(fā)生了變化，被發(fā)現(xiàn)了。腎臟是最好的。在隨后的研究中，給大鼠每日劑量為100毫克/公斤的三聚氰胺，給藥14天后，三聚氰胺分布在膀胱、腎臟、胰腺和肝臟，其中膀胱中三聚氰胺濃度最高。事實證明。研究表明，三聚氰胺在動物體內(nèi)的分布不同，具體取決于給藥途徑或方法。 2.2 在動物體內(nèi)的代謝和排泄目前研究表明，三聚氰胺在體內(nèi)的代謝是一種不活躍或不活躍的代謝，以原形或同系物的形式直接從尿液中排出。 Mast等人的一項研究指出，大鼠單次口服三聚氰胺后，三聚氰胺迅速被吸收，血漿三聚氰胺在60分鐘內(nèi)達到峰值，90%的三聚氰胺通過腎臟排出體外。三聚氰胺在大鼠血漿中的半衰期為24小時。 2.7小時后，少量三聚氰胺從大鼠呼出氣（0.2%）和糞便（0.64%）中排出，血漿和肝臟之間的濃度差也隨之減小。雖然較小，但腎臟和膀胱濃度均顯著高于血漿濃度，其中膀胱濃度最高，表明三聚氰胺在Fischer 344雄性大鼠體內(nèi)并未被代謝。 Baynes等人給5頭斷奶仔豬靜脈注射三聚氰胺，劑量為6.13 mg/kg，結(jié)果三聚氰胺在斷奶仔豬血漿中的半衰期為4.04小時，腎清除率為27 mL/min，表觀分配體積為0.61L/kg。黃小燕等發(fā)現(xiàn)日糧中添加100 mg/kg、500 mg/kg、1000 mg/kg三聚氰胺的仔豬血漿中三聚氰胺的半衰期分別為6.53小時、6.02小時、6.51小時，我發(fā)現(xiàn)了這一點。 Wu等人對大鼠進行的一項研究發(fā)現(xiàn)，三聚氰胺的口服生物利用度為98.1%，單次口服100 mg/kg三聚氰胺后，96年后有63%的三聚氰胺重新釋放到尿液中。小時。被檢測到。這些研究表明，三聚氰胺一進入動物體內(nèi)就通過腎臟排出體外。在哺乳動物中，尿液是三聚氰胺的主要排泄途徑，但在蛋雞中，三聚氰胺也從蛋中排出，盡管這因種類和種類而異。動物兩個物種之間的三聚氰胺代謝存在顯著差異。 2.3 動物產(chǎn)品中的殘留及去除Yi等人報道，用5mg/kg、25mg/kg、50mg/kg或100mg劑量的三聚氰胺污染飼料喂養(yǎng)蛋雞后，雞蛋中含有三聚氰胺。沉積程度當添加一定量的三聚氰胺時，三聚氰胺沒有累積效應，而是隨著飼料污染程度的加快而呈現(xiàn)增加的趨勢。 Wendy等發(fā)現(xiàn)，魚類攝入299-471mg/(kgd)的三聚氰胺3天后，鯰魚中的三聚氰胺含量為81-210mg/kg，鱒魚中的三聚氰胺含量為34-80mg/kg，而三聚氰胺的含量則為34-80mg/kg。鯰魚中的含量在34 至80 毫克/公斤之間。羅非魚的含量范圍為0.02至177毫克/公斤，鮭魚體的含量范圍為58至94毫克/公斤。 Bai等人d)連續(xù)喂食。當連續(xù)34天施用62.6 mg/(kg·d)和140.9 mg/(kg·d)三聚氰胺時，飼料中較高劑量的三聚氰胺與組織和雞蛋中檢測到的較高濃度的三聚氰胺相關(guān)。在所有測試的樣品中，雞蛋的三聚氰胺濃度最高，十二指腸的三聚氰胺濃度最低。
第10天停止添加三聚氰胺時，蛋雞組織中三聚氰胺濃度降至2.5mg/kg，第7天雞蛋中不再檢出三聚氰胺，第20天也未檢出三聚氰胺。沒有。在您的組織內(nèi)未檢測到。 Shen等人研究了泌乳奶牛中不同劑量的三聚氰胺從飼料到牛奶的轉(zhuǎn)移。在為期19 天的研究中，動物連續(xù)13 天飼喂劑量為0（對照組）、90 毫克/天、270 毫克/天和450 毫克/天。結(jié)果，第3天牛奶中三聚氰胺含量逐漸升高，停止添加后第4天，所有試驗組均不再檢出三聚氰胺，三聚氰胺從飼料到牛奶的轉(zhuǎn)移率低于添加劑的影響。結(jié)果表明，它不受盡管劑量與產(chǎn)奶量有關(guān)，但呈線性相關(guān)。王偉研究了飼料中不同濃度的三聚氰胺在育肥豬的血液和身體組織中的保留和去除模式。檢測結(jié)果表明，育肥豬攝入三聚氰胺對采食量、日增重或飼料轉(zhuǎn)化率沒有明顯影響，并表明日糧中含有0.211000毫克/千克三聚氰胺，連續(xù)42天攝入后，體內(nèi)三聚氰胺水平下降。組織分別為0.04 至5.61 g/g（腎）、0.03 至2.80 g/g（背部肌肉）、0.02 至2.58 g/g（肝臟）、0（未檢測到）至2.56 g/g（腦）。 0.02 0.252g/g（心�。�0.022.55g/g（十二指腸）；攝入含1000mg/kg三聚氰胺的飼料42天后，上述組織中三聚氰胺殘留量均超過國際規(guī)定的限量標準超標為2.5mg/kg。當停止添加三聚氰胺5天后，育肥豬組織中殘留的三聚氰胺量迅速降至限量標準值以下，但三聚氰胺在組織中殘留的時間越長，去除就越困難。 3、有毒的三聚氰胺在胃的高酸性環(huán)境中水解，首先產(chǎn)生二酰胺氰尿酸，然后進一步水解產(chǎn)生氰尿酸，在腸道中被吸收到血液中到達體內(nèi)，這會對身體造成危害。表現(xiàn)出一定程度的專注并產(chǎn)生影響。經(jīng)濟合作與發(fā)展組織的報告指出，三聚氰胺的LD50在小鼠中為4,550毫克/公斤（口服），在大鼠中為3,161毫克/公斤（口服），這表明只有高劑量的三聚氰胺才有毒。對動物有輕度毒性。盡管三聚氰胺毒性較低，但攝入一定量后會影響生物體，引起膀胱炎和尿路結(jié)石等癥狀。通過對三聚氰胺本身對大鼠影響的研究，美國FDA（2008）認為三聚氰胺的每日耐受攝入量（TDI）為0.63毫克/公斤。 3.1 對泌尿系統(tǒng)的影響目前，三聚氰胺生物效應的主要靶器官被認為是泌尿系統(tǒng)。在動物體內(nèi)，三聚氰胺僅通過腎臟排泄，且其排泄速度很快，因此三聚氰胺毒性主要表現(xiàn)為腎毒性。在Clark 等人的一項綿羊研究中，連續(xù)四個星期每天給綿羊喂食10 克三聚氰胺，綿羊的采食量減少，出現(xiàn)少尿，死亡前血液尿素氮和肌酐濃度升高。對死亡動物的檢查顯示出血性膀胱炎和晶體沉積的癥狀在腎小管中。研究報告稱，豬和魚每天攝入400毫克/公斤的三聚氰胺后只能存活三天。 Xie等人對大鼠進行的一項研究中，三聚氰胺處理組大鼠的腎臟出現(xiàn)水腫，并發(fā)現(xiàn)體重比對照組有所增加，組織病理學檢查顯示，高劑量三聚氰胺遠端腎小管雖然有腎小管大量擴張，少量出血，腎小球正常，結(jié)晶主要沉積于腎乳頭集合管、腎間質(zhì)，可見炎癥。 2004年和2007年美國因食用三聚氰胺污染食物而死亡的16只狗和貓的臨床癥狀和解剖結(jié)果也表明，三聚氰胺主要對泌尿系統(tǒng)造成損害，得到證實。
16只動物均出現(xiàn)尿毒癥，同時在遠端曲折腎小管和集合管內(nèi)觀察到明顯的條紋狀晶體，晶體呈淺綠色，大部分呈圓形，有的呈球形。 Lam 等人研究了三聚氰胺對人體泌尿系統(tǒng)的影響。結(jié)果顯示，大部分結(jié)石位于腎盂，經(jīng)超聲測量，結(jié)石大小在2.5至18毫米之間。對于直徑小于10毫米的結(jié)石兒童，肌酐每增加10微克/毫摩爾，尿中三聚氰胺濃度就會增加。結(jié)石直徑增加1毫米，表明三聚氰胺暴露水平較高。表明結(jié)石越嚴重，腎結(jié)石大小越大，與尿三聚氰胺濃度呈正相關(guān)。關(guān)等人還發(fā)現(xiàn)，大多數(shù)三聚氰胺結(jié)石兒童沒有明顯的臨床癥狀。少數(shù)結(jié)石患者有少尿、血尿、蛋白尿等非特異性癥狀。有些人有多發(fā)結(jié)石或尿道擴張。嚴重者出現(xiàn)彌漫性腎損害、腎衰竭和腹水。 Kobayashi等人研究了小鼠攝入三聚氰胺和三聚氰酸后腎臟晶體形成和腎功能衰竭發(fā)展的機制，發(fā)現(xiàn)單獨使用三聚氰胺或低劑量三聚氰胺-三聚氰酸后，在小鼠的腎臟中沒有發(fā)現(xiàn)晶體。攝入該藥物的患者。然而，隨著劑量的增加和時間的推移，混合物治療組小鼠的遠端腎小管和集合管中出現(xiàn)了晶體。這些結(jié)果表明，三聚氰胺單獨不能誘導晶體形成或?qū)е履I衰竭。然而，研究表明，當兩者同時存在時，毒性會增加。 Puschner等人給動物（貓）施用不同劑量的三聚氰胺、三聚氰酸及其混合物，結(jié)果表明，三聚氰胺或三聚氰酸單獨給藥時，不會引起貓的腎功能?*�。施用笡]旌銜錆?8小時后出現(xiàn)腎衰竭。 Dobson等人以SD大鼠為研究對象，發(fā)現(xiàn)單獨使用氰尿酸對SD大鼠的腎功能沒有影響。使用二酰胺和氰尿酰胺的混合物，我們證明兩種或四種的混合物會導致SD 大鼠腎功能損傷和腎結(jié)石形成。三聚氰胺與類似物質(zhì)結(jié)合，在腎小管內(nèi)形成不溶性晶體，最終導致管腔阻塞和腎功能衰竭。 3.2 對血液生化指標的影響黃曉燕等發(fā)現(xiàn)仔豬日糧中添加三聚氰胺有降低丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶（GPT）和天冬氨酸草酸轉(zhuǎn)氨酶（GOT）活性的傾向。 Wang等人對懷孕雌性大鼠的研究發(fā)現(xiàn)，三聚氰胺喂養(yǎng)對血液中GPT和GOT活性沒有顯著影響。王偉教授通過在育肥豬飼料中添加三聚氰胺的實驗，測定了豬血液中谷丙轉(zhuǎn)氨酶和天冬氨酸轉(zhuǎn)氨酶的活性，以及血肌酐和胱抑素C的含量。結(jié)果表明，飼料中添加高劑量三聚氰胺（1,000 mg/kg）對育肥豬第28天和第42天的血丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶和血肌酐顯著升高（P>0.05）有影響。對血漿胱抑素C含量無影響。 3.3 對生殖和發(fā)育的影響研究表明，動物長期接觸三聚氰胺可導致不育和胚胎毒性。張等人發(fā)現(xiàn)，三聚氰胺會增加精子變形的速度，并會導致DNA損傷。
Wang等人從第13天開始使用低劑量（40毫克/公斤）和高劑量（400毫克/公斤）研究了三聚氰胺穿過小鼠胎盤轉(zhuǎn)運的潛力及其對胎兒和懷孕母親的影響。我發(fā)現(xiàn)了這一點。 F334小鼠在妊娠第20天灌胃三聚氰胺時，低劑量組小鼠羊水中未檢出三聚氰胺，而高劑量組血漿和胎兒三聚氰胺濃度極顯著升高。研究表明，攝入的三聚氰胺會穿過胎盤，到達胎盤屏障。盡管對胎兒有劑量依賴性影響，但不同劑量的三聚氰胺不會影響母親的體重或數(shù)量。在胎兒體重、胎兒和胎盤中均未發(fā)現(xiàn)結(jié)晶體體重或胎兒腎臟。 3.4 致癌性根據(jù)WHO IARC分類，三聚氰胺被列為第三類致癌物。也就是說，它是一種尚未被歸類為對人類致癌的物質(zhì)或混合物。三聚氰胺的致癌性僅在大鼠和小鼠中進行過研究。雄性大鼠攝入三聚氰胺后會患?*螂綴褪淠蜆芤菩邢赴凰淙蝗矍璋范源菩源笫竺揮兄擄┬�，但它会蒂Z亂菩邢赴琢齙姆⒄�，并且三聚氰胺荫Z恢っ鞫圓煌畝鎘脅煌畝拘�。雄性大鼠膀胱肿笼_姆⒉÷視肽蚵方崾緯珊統(tǒng)中喲ジ嘸亮咳矍璋犯叨認喙�。雄性大鼠膀胙b┑姆⑸樸隓NA損傷無關(guān)，可能是膀胱內(nèi)上皮細胞增殖和晶體沉淀引起的。這些研究還表明，三聚氰胺在引起膀胱結(jié)石時具有致癌性。總之，三聚氰胺對生物體（包括人類和動物）具有毒性作用，主要損害泌尿系統(tǒng)。三聚氰胺和三聚氰酸單獨施用于動物時毒性非常低。然而，當聯(lián)合使用時，它們會產(chǎn)生顯著的毒性作用，主要對泌尿系統(tǒng)造成損害，例如形成腎結(jié)石和膀胱結(jié)石，并增加腎衰竭和形成泌尿道腫瘤的風險。其毒性具有物種選擇性，對貓和大鼠的腎毒性比對小鼠的腎毒性更大。而且，對雄性動物的毒性作用更為明顯。 4 國內(nèi)和國際限制要求2012年7月5日，負責制定食品安全標準的聯(lián)合國CAC制定了牛奶中三聚氰胺限量新標準。不要超過0.15mg。美國、歐盟等國家和組織也制定了各類食品中三聚氰胺的最大殘留限量標準（見表7-5）。一般來說，大多數(shù)國家將嬰幼兒配方奶粉中三聚氰胺的限量標準定為1毫克/千克，其他乳制品中三聚氰胺的限量標準為2.5毫克/千克。 2008年9月13日，中國國家食品質(zhì)量監(jiān)督檢驗中心指出，三聚氰胺屬于化學原料，不允許在食品中添加，10月8日，衛(wèi)生部、工業(yè)和信息化部農(nóng)業(yè)部、國家工商總局、國家質(zhì)量監(jiān)督檢驗檢疫總局聯(lián)合發(fā)布公告，設(shè)定乳及乳制品中三聚氰胺暫行控制值，即限量值針對嬰兒奶粉中的三聚氰胺。奶粉的含量為1mg/kg，超過1mg/kg的產(chǎn)品不能銷售。液態(tài)奶（含原料奶）、奶粉及其他奶粉中三聚氰胺限量為2.5毫克/公斤，超過2.5毫克/公斤的產(chǎn)品不得銷售。其他含奶量超過15%的食品中三聚氰胺限量為2.5毫克/公斤，超過2.5毫克/公斤的產(chǎn)品不得銷售。
5.樣品前處理技術(shù)牛奶、肉類、奶粉等動物源性食品樣品富含蛋白質(zhì)和脂肪，這對三聚氰胺殘留物的檢測造成重大?*�，因凑b枰捎醚非按砑際�。通过提取、纯化、浓缩祬s砑際酰コ分械娜矍璋凡辛�，去除影响检测的X又食煞鄭岣嘸觳夥椒ǖ牧槊舳取Ｄ殼俺Ｓ玫腦ご砑際醢ㄈ薌凜腿〖際�、固相萃取茧H�、基质分散固相萃取茧H�、纺[佑〖＜際鹺兔庖咔綴筒鬮齟炕際酢?5.1 溶劑萃取技術(shù)溶劑萃取是20世紀發(fā)展起來的一種分離技術(shù)，其原理是利用溶質(zhì)將不同性質(zhì)的物質(zhì)分散在互不相溶或部分互溶的兩個液相之間，以達到分離或純化的目的。目標物質(zhì)，包括液體。 - 液體萃�。↙LE）和加速溶劑萃取（ASE）具有選擇性高、分離效果好、適應性廣的特點。三聚氰胺是一種弱堿性化合物，在強酸或強堿環(huán)境下會發(fā)生水解。三聚氰胺提取可在中性、酸性或堿性條件下進行，但對于食品基質(zhì)，更常用中性和酸性（pH3）條件下的提取。對于中性條件下的萃取，通常使用乙腈-水或甲醇-水的混合物作為萃取劑。對于酸性條件下的萃取，可以使用各種溶劑及其混合物，包括三氯乙酸、甲酸、乙酸、鹽酸和三氟乙酸，但最常用的是三氯乙酸。受三聚氰胺污染的樣品一般富含脂肪和蛋白質(zhì)，因此提取前必須進行脫脂和蛋白質(zhì)沉淀�？梢韵扔谜和楹投燃淄槿芤好撝�，然后用三氯乙酸沉淀蛋白質(zhì)，最后用乙腈沉淀蛋白質(zhì)。提取三聚氰胺。但對于三聚氰胺和三聚氰酸的同時檢測，目前，為了避免三聚氰胺和三聚氰酸的氨基和羥基發(fā)生聚合反應，形成不溶性水合物，一般對原料奶中的三聚氰胺及其有關(guān)物質(zhì)進行測定。使用以下方法。對于酸性或堿性溶液條件，混合萃取劑由水相和乙腈組成，水相主要有三氯乙酸溶液、醋酸鉛溶液、二乙胺溶液等。乙腈具有一定的蛋白質(zhì)沉淀作用，可以去除樣品中的部分蛋白質(zhì)，但如果乙腈含量過高，三聚氰酸和三聚氰胺很容易形成網(wǎng)狀聚合物并沉淀，降低萃取效果，最終影響萃取效果。提取�；厥章始胺�(wěn)定性。朱叢英等人做了實驗，比較了20%二乙胺-乙腈、2%三氯乙酸-乙腈、2.2%醋酸鉛-乙腈、乙腈水溶液的提取效果。結(jié)果表明，在酸性或堿性條件下都有良好的回收率，其中用醋酸鉛沉淀蛋白質(zhì)效果最好。通過提取液配比優(yōu)化試驗，選擇體積比為1:1的20%二乙胺-乙腈溶液作為提取液，加入1 mL飽和醋酸鉛溶液沉淀蛋白質(zhì)。 5.2 固相萃�。⊿PE）技術(shù)SPE是應用液相色譜分離機理，利用固體吸附劑萃取原理，提取目標物質(zhì)的樣品純化技術(shù)。吸附保留在柱內(nèi)，用選擇性溶劑除去雜質(zhì)后，用洗脫液洗脫或加熱解吸，達到分離濃縮目標化合物的目的。由于三聚氰胺是一種弱堿性化合物，在酸性溶液中會電解成陽離子，因此陽離子交換SPE柱（如強陽離子交換、混合模式陽離子交換和聚苯乙烯陽離子交換）通�？梢匀コ栯x子。用于樣品純化以去除酸性干擾。目前，SPE柱最廣泛用于選擇性提取和濃縮各種基質(zhì)中的三聚氰胺，例如SCX-C18混合裝反相色譜柱、Waters Oasis MCX柱和Strata-X-C柱。
蔡勤仁及其同事建立了一種檢測豬組織中三聚氰胺、三聚氰酸、三聚氰胺、二氰尿酸鹽和環(huán)美辛的LC-MS/MS方法。對比MCXSPE柱和石墨化炭黑柱的凈化效果，Sepucol石墨化炭黑柱對五種三聚氰胺化合物的回收率均滿足要求。酰二酰胺的回收率最高，但三聚氰酸或三聚氰酸酰胺的保留很少。洗滌液和洗脫液的類型和使用順序也會影響三聚氰胺的檢測。理論上，為了純化三聚氰胺，樣品應該用酸性水溶液洗滌，然后用甲醇洗脫，因為酸性條件促進陽離子基團與三聚氰胺的結(jié)合。盡管SPE具有高效、快速、簡單、溶劑消耗低等優(yōu)點，但在處理大量樣品時仍然是一項耗時且費力的任務。在實際應用中，SPE通常使用其他分析技術(shù)（例如SPE-HPLC、SPE-LC-MS和SPE-LC-MS/MS）自動在線操作。 5.3 基質(zhì)分散固相萃取技術(shù)基質(zhì)分散固相萃取是Anastassiades等人提出的一種快速預處理方法，省去了氮吹過程，一步完成樣品提取純化即可。傳統(tǒng)SPE 方法中由于溶解、溶解、轉(zhuǎn)移、乳化和濃縮而導致測試組分損失。與傳統(tǒng)的殘留檢測方法相比，該純化方法具有回收率高、穩(wěn)定、簡單、快速、經(jīng)濟、環(huán)保等優(yōu)點。楊玉秀等利用DSPE純化方法，更有效地去除了脂肪和蛋白質(zhì)含量高的海鮮、復雜成分、色素、糖類、有機酸、石墨化碳等樣品中的雜質(zhì)，并對黑色、中性氧化3種純化進行了比較。材料：鋁和乙二胺-N-丙基硅烷(PSA)。結(jié)果表明，石墨化炭黑能有效去除雜質(zhì)，但對三聚氰胺有較強的吸附作用，不適合水產(chǎn)品中三聚氰胺的凈化；中性氧化鋁粒徑小，PSA比表面積小，吸附力大，比表面積大，吸附力強，對產(chǎn)品中的蛋白質(zhì)、脂肪有良好的吸附性能，能有效去除干擾成分；PSA含有伯胺基和仲胺基，具有弱負電性；具有離子交換能力，有效去除干擾成分；對抗有機酸、色素、糖等。海洋產(chǎn)品，滯留效果極佳。通過實驗，選擇100 mg中性氧化鋁和50 mg PSA凈化效果較好。 5.4 分子印跡技術(shù)（MIT） MIT是一種利用具有分子識別功能的分子印跡聚合物（MIPs）的識別技術(shù)，具有與抗體一樣的高選擇性、高特異性、靈活性等優(yōu)點，適合用作SPE 。利用填料或分子印跡膜對目標化合物進行分離和濃縮，以達到樣品分離純化的目的。迄今為止，使用MIP作為固相吸附劑特異性提取三聚氰胺的研究相對較少。 Li等人以環(huán)丙基三氨基三嗪為模板分子，甲基丙烯酸、乙二醇二甲基丙烯酸酯和乙腈作為功能單體、交聯(lián)劑和致孔劑，制備了特異性識別三聚氰胺的MIP。該聚合物對三聚氰胺的最大結(jié)合濃度為53.2 mmol/mg，將其作為SPE吸附劑提取樣品中的三聚氰胺，建立了牛奶和飼料中三聚氰胺的MIT-GC-MS分析方法。檢測限為0.01。 g/g，定量限為0.05/g，樣品加標回收率為93.1%至101.3%。牛繼偉等以三聚氰胺為模板分子，采用沉淀聚合的方法制備了選擇性高、吸附能力強的三聚氰胺MIP，將其作為SPE吸附劑，結(jié)合HPLC檢測奶粉中殘留的微量三聚氰胺。樣品被檢測到。
結(jié)果，提取回收率為85.1%~99.7%，SPE工藝避免了復雜的樣品濃縮過程，縮短了樣品前處理時間，減少了二次污染，使得大樣品的直接純化和濃縮得以實現(xiàn)。提取，降低了整體檢測方法的檢測限。何利民等人以環(huán)丙嗪為虛擬模板分子，甲基丙烯酸為功能單體，乙二醇二甲基丙烯酸酯為交聯(lián)劑，采用本體聚合方法合成了具有優(yōu)異三聚氰胺識別能力的MIP。該方法可有效分離、純化和濃縮雞蛋中的三聚氰胺，并與GC-MS技術(shù)結(jié)合對雞蛋中的三聚氰胺進行定量，該方法的檢出限為10 g/kg，平均響應率為82.8%。 5.5 免疫親和層析（IAC） IAC的原理是將特異性抗體固定在瓊脂糖凝膠或聚丙烯酰胺凝膠等固相支持物上，置于柱上，在抗原和抗體之間通過，即可實現(xiàn)完美結(jié)合�？赏瑫r分離純化樣品中的目標物質(zhì)，并可濃縮樣品中的目標物質(zhì)，從而提高檢測靈敏度，選擇性好，操作簡便快捷，耗時少，試劑用量少。具有省錢的優(yōu)點。這是一種重要的預處理方法。鐘等人研制了三聚氰胺IAC柱，用于提取和純化受污染食品中的三聚氰胺殘留物，該柱對三聚氰胺的最大結(jié)合容量為1250ng，加標回收率為82.5%101.4%。超過10.6%，可重復使用達30次，可直接提取家禽、雞蛋和乳制品中的三聚氰胺殘留物，無需樣品預處理。 6 檢測方法目前，國內(nèi)外檢測食品中三聚氰胺的方法主要為HPLC、LC-MS、GC-MS等色譜分析方法以及毛細管電泳（CE）、免疫分析、分子印跡技術(shù)等。接下來。近紅外吸收檢測法、熒光分析法等。 6.1 色譜分析方法色譜分析方法是目前應用最廣泛的檢測方法，具有快速、分離效果好、劑量低、無樣品限制等特點，尤其對高沸點、大分子、強物質(zhì)適用。分析極性、熱穩(wěn)定性和穩(wěn)定性差的化合物。關(guān)于用色譜法測定三聚氰胺的報道很多。三聚氰胺的色譜分析檢測方法主要有GC、LC、GC-MS、LC-MS等。目前，我國國家標準規(guī)定的生鮮乳及乳制品中三聚氰胺的檢測方法有HPLC、HPLC-MS/MS和GC-MS。該方法在生鮮乳及乳制品中的定量限為2mg/kg。 6.1.1 高效液相色譜法高效液相色譜法是目前食品中三聚氰胺檢測最常用的方法，國內(nèi)外已有較多報道（表7-6）。當三聚氰胺標準品在200500 nm波長范圍內(nèi)掃描時，發(fā)現(xiàn)三聚氰胺在236.3 nm處有最大吸收，樣品中的三聚氰胺也在237.4 nm處呈現(xiàn)出最大吸收（圖7-13） ）。我們發(fā)現(xiàn)，大多數(shù)報道都將240nm作為三聚氰胺的檢測波長。由于三聚氰胺的紫外吸收光譜低于250 nm，如果樣品制備和色譜條件不優(yōu)化，很可能出現(xiàn)假陽性結(jié)果。為了提高結(jié)果的靈敏度和可靠性，經(jīng)常使用DAD系統(tǒng)和熒光反應。結(jié)合起來檢測樣品中的三聚氰胺殘留量。根據(jù)三聚氰胺的化學性質(zhì)，通常使用兩種類型的色譜柱進行分離。一種是C18和C8柱。三聚氰胺是一種高極性化合物，傳統(tǒng)的反相色譜沒有保留能力。為了獲得分離效果，必須在流動相中加入離子對試劑，使三聚氰胺中生成弱極性物質(zhì)。常用緩沖液和乙腈。作為流動相。文獻中描述的流動相大多采用檸檬酸作為緩沖劑，庚烷磺酸鈉、辛烷磺酸鈉、己烷磺酸鈉作為離子對試劑，以及按特定比例混合的乙腈。另一種是陽離子交換色譜LC-SCX柱或IonPac CS柱。
該方法常采用磷酸鹽緩沖液作為流動相，在240 nm的紫外波長下進行檢測，樣品回收率、相對標準偏差和重現(xiàn)性較好。但磷酸鹽緩沖液是一種優(yōu)良的細菌培養(yǎng)基，在使用過程中溶液會變得渾濁，菌落沉降，所以用醋酸銨或毒性相對較小的甲醇代替磷酸鹽緩沖液，也有人用它作為固定相。
6.1.2 LG-MS LG-MS 的樣品制備與HPLC 幾乎相同，但使用MS 作為檢測器在靈敏度和抗干擾性方面提供了一些改進，從而提高了靈敏度和重現(xiàn)性。由于檢測限低，既可定性又可定量，因此準確度高，誤報率低。目前，LC-MS和LC-MS/MS是三聚氰胺定性檢測最重要的方法，國內(nèi)外有很多相關(guān)的研究報道。 Andersen 等人報道了魚、蝦和其他動物產(chǎn)品中三聚氰胺和三聚氰酸的LC-MS/MS 檢測。方法為酸性乙腈萃取，二氯甲烷脫脂，混合陽離子交換SPE柱濃縮/濃度，同位素稀釋法定量。平均回收率為63.8%，相對標準偏差為21.5%。建立了LC-MS/MS方法檢測羔羊肝、腎組織和血清中的三聚氰胺和三聚氰酸殘留。結(jié)果表明，羔羊組織中三聚氰胺和三聚氰酸的檢出限分別為10 ng/g和20 ng/g，血清中三聚氰胺和三聚氰酸的檢出限分別為30 ng/mL和40 ng/mL。趙玉娟等報道了檢測飼料中三聚氰胺的LC-MS/MS方法。料液用10 g/L三氯乙酸溶液提取，22 g/L醋酸鉛溶液沉淀蛋白質(zhì)，混合陽離子交換柱純化，離心，0.45 m濾膜過濾，LC-分析MS/MS。分析和測量。三聚氰胺母離子126.9m/z、子離子67.5m/z 和84.6m/z 來鑒定和定量分析物。加標飼料樣品的回收率為84.5%，檢出限為0.01 g/L，相對標準偏差為6.5%。黃友勝等建立了快速測定雞蛋中三聚氰胺殘留量的HPLC-MS/MS方法。采用正離子掃描方式
（ESI＋）進行分析，以母離子126.9m/z、子離子67.9m/z和84.8m/z定性和定量待測物（圖7-14）。該法檢測限可達3μg/kg，定量限為10μg/kg，添加樣品回收率為87.0%~96.8%。 但是由于三聚氰胺及其同系物為強極性的小分子化合物，在C18鍵合相色譜柱中幾乎無保留。常通過添加離子對試劑，形成反相離子對色譜來解決這一問題，但添加高離子強度的緩沖鹽和非揮發(fā)性的離子對試劑，不適用電噴霧離子源分析，且反相離子對色譜難以在一次運行中同時分離酸性和堿性物質(zhì)。測定三聚氰胺常用磺酸基與C18混合填料色譜柱，這種填料色譜柱利用了陽離子交換與反相保留的機理，增加了堿性化合物與極性化合物的保留，它對三聚氰胺類陽離子化合物有很強的保留，但對三聚氰酸則不能保留。對于極性化合物而言，理想的解決方案是采用親水作用色譜（HILIC）。HILIC機理是極性的待測物在相對非極性的流動相和極性的固定相之間進行分配。在HILIC中，水被吸附在固定相的表面，主要依靠分配作用分離，而非吸附作用。Andersen等用HILIC柱進行LC-MS/MS分析，可對魚和蝦組織中三聚氰胺殘留進行定性和定量分析，其檢測限為3.2μg/kg。Heller等建立了HILIC/LC-MS/MS法同時檢測動物飼料中的三聚氰胺和三聚氰酸。將兩性離子對添加到HILIC柱中，在pH梯度變化時可很好地將三聚氰胺和三聚氰酸分離，最低檢測限為0.5μg/g。此外，利用LC-MS對三聚氰胺及其同系物的多殘留檢測也有報道。何君等建立同時檢測大鼠血漿和組織中三聚氰胺和三聚氰酸含量的方法。在選擇色譜條件時，在流動相中加入離子對試劑，采用體積比為9∶1的乙腈水溶液，并混有5mmol/L的乙酸銨和0.1%乙酸的流動相，以改善其在反相柱上的保留行為，同時加入甲酸提高離子化效率，使得三聚氰胺在色譜柱上能夠較好保留；MS條件采用ESI離子源、SIM模式，并采用按運行時間段切換正、負離子模式，三聚氰胺采用正離子模式，三聚氰酸采用負離子模式，得到了較好的色譜峰和較高的靈敏度。簡龍海等為避免使用ESI源產(chǎn)生基質(zhì)抑制效應而導致靈敏度差的問題，采用APCI源同時進行尿液中三聚氰胺和三聚氰酸的測定，基質(zhì)抑制效應可明顯改善，三聚氰酸和三聚氰胺的靈敏度明顯增強。蔡勤仁等建立了豬組織中三聚氰胺、三聚氰酸、三聚氰酸一酰胺、三聚氰酸二酰胺及環(huán)丙氨嗪的LC-MS/MS檢測方法。進行了色譜條件選擇和MS條件優(yōu)化試驗，結(jié)果表明，Waters Atlantis HILIC柱分離效果最好，并通過洗脫梯度的調(diào)節(jié)，將正負兩組離子分開，采用正負離子切換的掃描方式（表7-7），靈敏度和峰形良好，方法檢出限為2μg/kg，回收率為94.2%~99.9%，相對標準偏差為3.8%~7.5%。 6.1.3 GC-MSGC-MS也常用來定量檢測和確證三聚氰胺及其類似物。由于三聚氰胺及其類似物均是沸點較高的極性化合物，且均含有—OH、—NH2等極性官能團結(jié)構(gòu)，難汽化，直接采用LC進行分離較為困難，不但靈敏度低且峰拖尾嚴重。為改善各組分LC性質(zhì)，在進行儀器檢測前必須對樣品進行衍生化處理。1987年，Toth等首先報道用GC-MS法來檢測環(huán)丙氨嗪及其代謝物三聚氰胺。Zhu等也采用GC-MS法同時定量和確證動物源性食品中環(huán)丙氨嗪和三聚氰胺殘留。樣品制備時首先用酸性的乙腈或水溶液提取，然后將雞肉或魚肉用二氯甲烷脫脂，雞蛋或牛奶樣本用3%三氯乙酸萃取，而后提取物經(jīng)MCX柱純化，進樣前用N，O-雙（三甲基硅烷基）三氟乙酰胺衍生。肌肉組織中檢測限為10μg/kg，牛奶和雞蛋中檢測限為5μg/kg。王征采用N，O-雙（三甲基硅烷基）三氟乙酰胺衍生化，極性的減弱使其容易汽化，有利于待測物和基質(zhì)的分離，降低了背景化學噪聲的影響。王立媛等用GC-MS法檢測奶粉和鮮奶中三聚氰胺，加標回收率為82.3%~110.0%，相對標準偏差小于10%，方法凈化效果好、準確度高、靈敏度好、重現(xiàn)性高。呂燕等建立了雞蛋中三聚氰胺殘留檢測的GC-MS方法。采用三氯乙酸、乙酸鉛混合溶液提取雞蛋中三聚氰胺，經(jīng)混合型陽離子交換固相萃取柱（Cleanert PCX，60mg/3mL）凈化后衍生，生成穩(wěn)定的衍生物后用GC-MS儀檢測。方法靈敏度高，最低檢測限為5μg/kg，回收率為72.31%~99.87%，相對標準偏差不大于11%。但是GC-MS法需要進行衍生化，樣品處理步驟復雜、過程不易控制，不適用于多雜質(zhì)生物檢材中三聚氰胺的快速篩查和定量分析，不能滿足快速大批量檢測的需要。針對此問題，李東剛等利用離子阱GC-MS儀，建立了非衍生化-GC-MS/MS直接分析飼料中三聚氰胺的方法。利用三聚氰胺的二級質(zhì)譜進行定性，以二級質(zhì)譜的特征離子峰m/z 85進行定量，方法的精密度為5.9%，回收率為87%~98%，可滿足飼料中三聚氰胺檢測的限量要求。朱聰英等建立了用GC-MS同時檢測三聚氰胺、三聚氰酸、三聚氰酸一酰胺、三聚氰酸二酰胺的方法。為改善各組分GC性質(zhì)，樣品經(jīng)BSTFA衍生化后，所含氨基、羥基上的氫均可被三甲基硅烷（TMS）所取代，形成含有3個硅烷基結(jié)構(gòu)的衍生物（Tri-TMS），此時的色譜行為良好。衍生化后的4種化合物的質(zhì)譜圖見圖7-15。三聚氰胺、三聚氰酸、三聚氰酸一酰胺、三聚氰酸二酰胺衍生物的特征離子分別是（m/z 342、327、171、285）、（m/z 345、330、100、147）、（m/z 344、329、171、100）和（m/z 343、328、171、285），其定量離子分別是m/z 327、345、344、343。6.2 CECE又稱為高效毛細管電泳（HPCE），是一種以毛細管為分離通道、高壓直流電場為驅(qū)動力，依據(jù)樣品中各組分間電荷大小和親水性的差異而實現(xiàn)分離的技術(shù)。CE具有樣品用量少、分析成本低、分離效率高和基質(zhì)干擾程度低等優(yōu)點，被廣泛用于各個領(lǐng)域，用HPCE分析三聚氰胺的研究已有不少報道。 與HPLC法相比，HPCE法兼有電泳和色譜雙重技術(shù)的特點。HPCE分離效率比HPLC法高，且分離迅速，經(jīng)相同前處理后，HPCE法比HPLC法對三聚氰胺的分離效果更好；HPCE法樣品消耗量比HPLC少；HPCE比HPLC經(jīng)濟環(huán)保，HPLC使用的色譜柱價格是毛細管柱價格的幾倍。此外，HPLC分析一個樣品時，時間越長消耗流動相越多，不僅價格昂貴，而且給環(huán)境造成嚴重的危害。而用HPCE檢測一個樣品只需1mL緩沖溶液，價廉易得，對環(huán)境幾乎無污染。但是由于HPCE進樣量少、毛細管柱內(nèi)徑小、光程短（CE檢測窗口僅為液相檢測池的1/20），它的靈敏度受到嚴重限制，且穩(wěn)定性也有待提高，所以常規(guī)CE檢測痕量三聚氰胺還有一定的局限性，只能用于含量較高的樣品分析。饒欽雄等利用CE檢測雞蛋中三聚氰胺分離時間約6min，測得的定量限為0.25mg/kg。為了提高檢測靈敏度，常將CE與UVD、DAD等聯(lián)合進行食品中三聚氰胺殘留的痕量檢測。Cernova等采用CE-UCD對奶粉中的三聚氰胺進行快速檢測，其檢測限可達到0.06μg/mL。Yan等提出用CE-DAD檢測奶制品、魚飼料和魚肉等多種樣品中的三聚氰胺殘留。Chen等運用CE也建立了一種可同時檢測牛奶中三聚氰胺和5-羥甲基呋喃甲醛的靈敏、簡單和可靠的分析方法。該方法將CE和DAD聯(lián)用，在檢測系統(tǒng)中添加十二烷基磺酸鈉作為篩選介質(zhì)以增加分離效率。結(jié)果表明，根據(jù)遷移時間和紫外吸收光譜的不同可實現(xiàn)三聚氰胺和5-羥甲基呋喃甲醛的同時檢測，其檢測限分別為0.047μg/mL和0.067μg/mL，與HPLC法相比具有分辨率高、分析時間短、所需樣品量少、分離效率好等優(yōu)點。Xia等將毛細管區(qū)帶電泳（CEZ）法聯(lián)合二極管陳列檢測器（CZE-DAD）建立了一種簡單、快速、準確并可同時檢測雞蛋、寵物飼料和奶制品中的三聚氰胺及其類似物的方法。有報道，與HPLC、熒光光度法和常規(guī)的CZE等方法相比，場放大進樣-曲帶毛細管電泳（FESI-CZE）具有以下明顯優(yōu)勢：①靈敏度高。利用在線富集技術(shù)可使靈敏度提高近3個數(shù)量級，彌補了CE-UVD在測量靈敏度上的缺陷。②抗干擾能力強。在電滲流被抑制的情況下采用電進樣方法，對進入毛細管中的成分具有選擇性，進樣時樣品通過電泳作用力引入毛細管中，在正向進樣電壓下，僅陽離子化合物能進入毛細管中，而基質(zhì)中一些中性分子或陰離子化合物不能進入或只能少量進入毛細管中，從而克服了樣品中存在的部分干擾。③運行成本低，經(jīng)濟環(huán)保。利用FESI-CZE技術(shù)的優(yōu)勢，李娟等建立了基于水塞聯(lián)用FESI的CZE檢測多種樣品中三聚氰胺的分析方法。試驗條件：水塞組成為40%乙腈和60%水，水塞進入時間200s，進水壓力3kPa。以120mmol/L NaH2PO4緩沖液（pH2.2）-10%甲醇為運行緩沖溶液，以0.10mmol/L NaH2PO4緩沖液（pH2.2）-20%乙腈為樣品基體溶液，進樣電壓20kV，進樣時間80s，分離電壓20kV。通過在水塞后電動大體積進樣可提高UVD的靈敏度，且采用電動進樣，對進入毛細管中的樣品具有選擇性，樣品基質(zhì)中的一些雜質(zhì)不能進入柱內(nèi)，能較好地克服樣品基質(zhì)的影響。在優(yōu)化試驗條件下，與普通的CZE法比較，三聚氰胺的紫外檢測靈敏度提高了800倍（圖7-16），檢出限由2.0mg/L降至2.5μg/L，線性范圍為10~1 000μg/L，添加樣品回收率為98%~106%，相對標準偏差均不高于5.1%。 6.3免疫分析法免疫分析法在食品安全檢測中應用廣泛，常被用作快速篩選方法。免疫學法是一種快速檢測三聚氰胺的方法，其原理是利用萃取液通過均質(zhì)及振蕩的方式提取樣品中的三聚氰胺并進行免疫測定。該法優(yōu)點是操作簡便、分析速度快、可大批量篩選；缺點是與分析樣品類似的結(jié)構(gòu)物也可與特異性抗體發(fā)生反應，從而產(chǎn)生干擾，在檢測過程中存在假陽性問題，對陽性樣品需確證方法進行確證。三聚氰胺事件后，國內(nèi)外開始研究三聚氰胺完全抗原的合成、多克隆抗體及單克隆抗體的制備等工作。由于三聚氰胺相對分子質(zhì)量僅為126，是典型的小分子半抗原，用制備的三聚氰胺人工抗原來刺激機體免疫系統(tǒng)產(chǎn)生特異性抗體。首先需要選擇合適的三聚氰胺結(jié)構(gòu)類似物作為半抗原進行衍生化，然后采用合適的偶聯(lián)方法將其與載體蛋白連接得到完全抗原，關(guān)鍵在于不能破壞其表面結(jié)構(gòu)和保持最小的能量轉(zhuǎn)移，這對制備出高靈敏度、高特異性和穩(wěn)定性的三聚氰胺抗體是至關(guān)重要的。目前主要有ELISA法和膠體金免疫層析法�？紤]到三聚氰胺具有環(huán)狀對稱的特殊結(jié)構(gòu)，有3個氨基可供偶聯(lián)載體，如果采用氨基的反應直接與蛋白連接，則3個氨基都可以同載體蛋白偶合，導致三聚氰胺完全被大分子蛋白包圍，這樣的抗原不能刺激產(chǎn)生高效價抗體。采用控制三聚氰胺和琥珀酸酐等量反應摩爾比的方法，只將其中1個氨基連接上帶有羧基的4碳間隔臂以合成完全抗原。Wang等建立了一種間接競爭ELISA法，可用于檢測豬和雞的組織及體液中三聚氰胺殘留，檢測限為50ng/mL，同時用GC-MS法確證，兩種方法顯示出很好的相關(guān)性。Lei等以碳二亞胺法合成三聚氰胺完全抗原，并免疫動物得到特異性多克隆抗體，建立了特異性檢測三聚氰胺的間接競爭ELISA法，檢測限為5.2ng/mL，定量限為7.6ng/mL。Liu等首先對三聚氰胺進行衍生化合成完全抗原，并免疫動物得到了三聚氰胺的多克隆抗體，建立ELISA法，并對動物肌肉組織中三聚氰胺殘留進行檢測，檢測限為1.8ng/g，樣品添加回收率為84.6%~94.3%。Yin等制備了抗三聚氰胺單克隆抗體，并建立了檢測牛奶、奶粉和動物飼料等樣品中三聚氰胺殘留的間接競爭ELISA法，實際樣品檢測限牛奶中為0.1mg/L、奶粉中為0.2mg/kg、飼料中為0.5mg/L，添加回收率為79%~110%。何方洋等利用三聚氰胺類似物與載體蛋白偶聯(lián)合成免疫原及包被原，免疫BALB/c小鼠，制備了抗三聚氰胺的單克隆抗體。蔡家利等也成功制備了抗三聚氰胺單克隆抗體，檢測限為0.15μg/mL，定量限為4.15μg/mL，除與三聚氰酸交叉反應率為72%外，與三嗪類藥物及其他抗菌藥物等交叉反應率均小于5%。目前，采用膠體金免疫層析法對三聚氰胺進行檢測的研究很少。Li等建立了食品中三聚氰胺殘留檢測的膠體金免疫層析法，原料乳檢測限為0.05μg/mL，動物飼料和奶粉檢測限為1μg/g，其他奶制品檢測限為2μg/g，整個檢測過程在3~10min完成。6.4分子印跡技術(shù)分子印跡技術(shù)是近年發(fā)展起來的一種新方法，可為人們提供具有期望結(jié)構(gòu)和性質(zhì)的分子聚合體。目前，新型的光響應分子印跡材料成為科研學者關(guān)注的熱點。這類功能化分子印跡材料通常是將偶氮苯作為功能單體引入分子印跡材料而制得的。由于偶氮苯化合物在光照下能在順反兩種構(gòu)型之間可逆地進行轉(zhuǎn)變，即在紫外光的照射下，偶氮苯由反式變?yōu)轫樖�；在熱作用或可見光條件下，偶氮苯由順式回到反式，因此在光響應性分子印跡材料中，作為特異性結(jié)合位點而存在的偶氮苯基團在光照下能夠發(fā)生異構(gòu)，引起MIP材料中特異性結(jié)合空腔的巨大變化，從而導致主-客體結(jié)合能力的改變。聶穎恬將分子印跡與偶氮苯光響應單體相結(jié)合，制備了含有偶氮苯光響應性功能單體的分子印跡水溶膠，該材料能在光照下實現(xiàn)對三聚氰胺分子的可控吸收和釋放。此外，三聚氰胺在特異性結(jié)合空腔中與偶氮苯功能單體發(fā)生相互作用，能影響偶氮苯功能單體異構(gòu)化速率，偶氮苯單體異構(gòu)化速率改變的大小和三聚氰胺的濃度有關(guān)，基于此構(gòu)建了一種新型的三聚氰胺快速檢測法，能準確檢出奶樣中三聚氰胺的含量，前處理方便，測試過程快速，準確性較好，檢測限可達0.25mg/kg。Pietrzyk等以三聚氰胺為模板分子、bis（2，2’-bithienyl）-benzo-[18-crown-6]methane為功能單體、3，3′-bis[2，20-bis（2，20-bithiophene-5-yl）]thianaphthene為交聯(lián)單體，通過電聚合方式制備出三聚氰胺MIP膜，建立了基于MIP膜的三聚氰胺化學傳感器分析法，其檢測限為5×10－9mol/L，檢測線性范圍為5×10－9~1×10－3mol/L。Liang等也建立了基于MIP的電位傳感器方法用于牛奶中三聚氰胺殘留檢測。以甲基丙烯酸為功能單體、二甲基丙烯酸乙二醇酯為交聯(lián)單體制備MIP，然后聯(lián)合離子選擇電極檢測牛奶中三聚氰胺，其檢測限為6.0μmol/L。6.5近紅外吸收檢測法在三聚氰胺的分子結(jié)構(gòu)中，3個C原子分別與2個N原子和1個-NH2連接。雖然C-N鍵的譜峰很難識別，但是-NH2的波動卻是正好處于近紅外區(qū)域，因此可以對三聚氰胺進行近紅外分析。該方法的原理是用一種特定波長的近紅外線照射被檢樣品，根據(jù)樣品中三聚氰胺對紅外線的吸收強弱來實現(xiàn)其含量的實時監(jiān)測，該法是一種無接觸、無損傷和無危害的檢測方法。對于三聚氰胺而言，其含量越高所反射出的光線強度就越弱。同時該法預先扣除了蛋白質(zhì)中-NH2含量的影響，選擇性相對較好。徐云等結(jié)合光譜預處理和波長選擇及模型優(yōu)化方法建立了測定牛奶中三聚氰胺含量的近紅外定量分析模型，具有較好的穩(wěn)定性和重復性（相對標準偏差小于10%）。但該法設(shè)備價格昂貴，需要不斷進行校準，不同樣品基質(zhì)中的干擾是近紅外分析精度及重現(xiàn)性的一大?*?.6熒光分析法三聚氰胺是一種三嗪類含氮雜環(huán)有機化合物，其分子中含有共軛雙鍵（π鍵）結(jié)構(gòu)及3個取代基-NH2，其激發(fā)態(tài)由環(huán)外氨基上的n電子激發(fā)轉(zhuǎn)移到環(huán)上而產(chǎn)生。由于它們n電子的電子云幾乎與芳環(huán)上π軌道平行，因而實際上它們共享了共軛π電子結(jié)構(gòu)，擴大了其共軛雙鍵體系，故具有熒光特性，在非極性的介質(zhì)中，它的熒光較弱，隨著介質(zhì)極性的提高，其熒光強度也隨之增大，當它處于酸性介質(zhì)中時，取代基-NH2會質(zhì)子化為-NH＋，熒光強度明顯減弱，甚至無熒光發(fā)生；而在弱堿性介質(zhì)中，其熒光強度明顯增強。黃暉等利用三聚氰胺的熒光特性建立了用熒光分光光度法測定牛奶中三聚氰胺的方法。利用弱堿性介質(zhì)中陽離子表面活性劑十六烷基三甲基溴化銨（CTMAB）對三聚氰胺熒光強度的增敏作用，在pH8.00的Tris-鹽酸緩沖溶液中，以CTMAB為增敏劑，用熒光光度計測定三聚氰胺，線性范圍為25~1000μg/L，檢出限為19μg/L，相對標準偏差為1.6%。